Informações de interesse técnico

Para que a coleta seja possível é necessário que o paciente receba um medicamento (filgrastima) que estimula a multiplicação das células tronco e progenitoras presentes na medula óssea e possibilita a migração temporária dessas células para o sangue periférico. Esse processo é chamado de mobilização e, por isso, o sangue periférico do paciente nesta fase é chamado de sangue periférico mobilizado.

A coleta das células é realizada nos dias de pico, ou seja, em que há maior migração das células para o sangue periférico. Isto ocorre em geral, no 5º dia após o início da utilização do medicamento. Antes de iniciar a coleta é feito um teste, chamado de quantificação das células CD34+ (marcador das células-progenitoras hematopoéticas), que é utilizado para avaliar a mobilização e decidir sobre a coleta. Esta é feita de modo automatizado, com o auxilio da máquina de aférese e de um kit estéril, descartável e de uso único. Neste processo, o sangue sai do doador/paciente, passa pelo equipamento, sempre por dentro do kit, ou seja, em nenhum momento o sangue tem contato direto com o equipamento. Os componentes do sangue são separados por centrifugação, o concentrado de células-progenitoras é coletado e o restante do sangue é devolvido para o paciente. Por esse motivo, é necessário que o paciente tenha duas veias ótimas ou coloque um cateter, que é um dispositivo que permitirá que a coleta seja feita.

Após a coleta, a bolsa contendo as células é encaminhada para processamento no Cetebio. Este pode ser dividido em algumas etapas principais: a) redução de volume; b) criopreservação e c) armazenamento. Paralelamente, são realizados vários testes de controle de qualidade do produto.

A redução do volume consiste na concentração da fração mononuclear que é rica em células-tronco e progenitoras hematopoiéticas. Essa etapa é feita com o auxílio de uma centrífuga e necessita da atuação direta e constante de um profissional de nível superior, treinado e capacitado para esta função, por isso, é considerado um “processamento manual”. Todo o material utilizado é estéril, descartável e de uso único. Após a centrifugação, o excesso de plasma (parte liquida do sangue) é removido. Na técnica utilizada pela equipe do Cetebio, o volume do produto nesta fase é reduzido para 100ml.

A criopreservação tem como objetivo diminuir e, se possível, inibir o metabolismo celular, desta forma, as células permanecem vivas e adequadas para uso por um período variável de tempo, a depender de uma série de fatores. Para que isso seja possível, é necessário adicionar à bolsa contendo o concentrado celular rico em células-tronco e progenitoras, uma solução crioprotetora à base de dimetilsulfóxido (DMSO) e hidroxietilamido (HES) de igual volume. A seguir, o produto é dividido em duas alíquotas de 100ml e as bolsas são congeladas e armazenadas em um freezer mecânico capaz de manter a temperatura de 80º C negativos. 

Próximo ao uso do produto, o Centro Transplantador avisa a equipe do Cetebio. Neste momento, são realizados novos testes de controle de qualidade que são encaminhados para o médico do paciente. Em uma data previamente agendada, a equipe do Cetebio prepara e envia a bolsa ainda criopreservada para o Centro de Transplante onde está o paciente. 

Indicação terapêutica

As indicações de transplante de células-tronco e progenitoras hematopoéticas encontram-se descritas no Anexo VII da Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009.

No caso específico das células progenitoras-hematopoéticas coletadas e processadas para uso autólogo (do próprio paciente), por aférese, as indicações são as seguintes:

a) leucemia mielóide aguda (LMA) em primeira ou segunda remissão; 

b) linfoma não Hodgkin agressivo quimiossensível, como terapia de salvamento após a primeira recidiva; 

c) doença de Hodgkin quimiossensível, como terapia de salvamento, excluídos os doentes que não se beneficiaram de um esquema quimioterápico atual; 

d) mieloma múltiplo; 

e) tumor de célula germinativa recidivado, quimiossensível, excluídos os doentes que não se beneficiaram de um esquema quimioterápico atual; e 

f) neuroblastoma em estádio IV e/ou alto risco (estadio II, III e IVS com nMyc amplificado e idade igual ou maior do que 6 meses, desde que bom respondedor à quimioterapia (remissão completa ou resposta parcial), em primeira terapia.

OBS: Casos especiais deverão ser encaminhados pelo médico do paciente para avaliação pela Câmara Técnica Nacional que tem até 30 dias para emitir o parecer.

Condições para transporte

O concentrado de células-progenitoras é transportado em dois momentos diferentes:

• Transporte do produto a fresco, em temperatura de 2 a 24º C. Para esse transporte utiliza-se o sistema de três embalagens em acordo com as diretrizes da Organização Mundial de Saúde (OMS).

• Transporte do produto criopreservado, em temperatura inferior da 150º C negativos, em dispositivo próprio para transporte a seco.

Em ambos os casos o produto é preparado para o transporte por pessoa treinada e capacitada e acondicionado em recipientes específicos. O transporte pode ser feito por pessoas da própria equipe do Cetebio ou por uma empresa especializada.

Legislação aplicada

• Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009 – Aprova o Regulamento Técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

• Resolução RDC n° 56, 16 de dezembro de 2010 – Dispõe sobre o regulamento técnico para o funcionamento dos laboratórios de processamento de células progenitoras hematopoéticas (CPH) provenientes de medula óssea e sangue periférico e bancos de sangue de cordão umbilical e placentário, para finalidade de transplante convencional e dá outras providências. 

• Portaria GM/MS no 2712 de 12 de novembro de 2013 – redefine o regulamento técnico de procedimentos hemoterápicos.

• RDC Anvisa no 20 de 10 de abril de 2014 - Dispõe sobre regulamento sanitário para o transporte de material biológico humano.

Informações de interesse técnico

O processamento do sangue de cordão umbilical e placentário consiste na concentração da fração mononuclear e depleção de hemácias para reduzir o volume das bolsas, antes do congelamento, e infusão de agente crioprotetor. O agente crioprotetor comumente utilizado no congelamento de células progenitoras hematopoéticas é o dimetilsulfóxido (DMSO), capaz de impedir a desidratação e lise celular decorrentes da formação de cristais de gelo intracelulares e concentração de sal extracelular. Esse processo de congelamento possibilita que as bolsas processadas por esse Banco possam ser armazenadas por, no mínimo, 10 anos, à temperatura de 135ºC negativos ou inferior.

O congelamento de bolsas é realizado de forma automatizada com velocidade de 1ºC/minuto até a temperatura ideal, utilizando-se câmaras de congelamento programado.

Quando registrada a necessidade de descongelamento de uma bolsa para transplante de medula, o Cetebio deve acondicioná-la corretamente e encaminhá-la ainda congelada ao serviço solicitante.

Indicação Terapêutica

As indicações de transplante de células-tronco e progenitoras hematopoéticas encontram-se descritas no Anexo VII da Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009.

No caso específico do SCUP armazenado nos BSCUP públicos, como o do Cetebio, as indicações são as seguintes:

Uso alogênico não-aparentado (doado por qualquer pessoa) em paciente com idade inferior a 60 anos:

a) leucemia mieloide aguda em primeira remissão, exceto leucemia promielocítica (M3), t(8; 21) ou inv. 16; 

b) leucemia mieloide aguda em segunda ou terceira remissão; 

c) leucemia linfoide aguda/linfoma linfoblástico em segunda ou remissões posteriores; 

d) leucemia linfoide aguda Ph+ entre a primeira e a segunda remissão; 

e) anemia aplástica grave adquirida ou constitucional;

f) síndrome mielodisplásica de risco intermediário ou alto, incluindo-se a leucemia mielomonocítica crônica nas formas adulto e juvenil - LMC juvenil; 

g) imunodeficiência celular primária; 

h) osteopetrose; e

i) mielofibrose primária em fase evolutiva.

Uso alogênico aparentado (doado por um parente de 1º grau, HLA compatível) em paciente com idade inferior a 65 anos:

a) leucemia mieloide aguda em primeira remissão, exceto leucemia promielocítica (M3), t(8;21) ou inv. 16; 

b) leucemia mieloide aguda em segunda ou terceira remissão; 

c) leucemia linfoide aguda/linfoma linfoblástico em segunda ou remissões posteriores; 

d) leucemia linfoide aguda Ph+ entre a primeira e a segunda remissão; 

e) anemia aplástica grave adquirida ou constitucional; 

f) síndrome mielodisplásica de risco intermediário ou alto, incluindo-se a leucemia mielomonocítica crônica nas formas adulto e juvenil - LMC juvenil; 

g) imunodeficiência celular primária; 

h) talassemia major, em caso de pacientes com menos de 15 anos de idade, com hepatomegalia até 2 (dois) centímetros do rebordo costal, sem fibrose hepática e tratados adequadamente com quelante de ferro; 

i) mielofibrose primária em fase evolutiva; 

j) linfoma não Hodgkin indolente; e 

k) doença de Hodgkin quimiossensível, como terapia de salvamento, excluídos os doentes que não se beneficiaram de um esquema quimioterápico atual.

OBS: Casos especiais deverão ser encaminhados pelo médico do paciente para avaliação pela Câmara Técnica Nacional que tem até 30 dias para emitir o parecer.

Condições para transporte

O BSCUP é transportado em dois momentos diferentes:

• Da maternidade até o BSCUP. Transporte do produto a fresco, em temperatura de 2 a 24º C. Para esse transporte utiliza-se o sistema de três embalagens em acordo com as diretrizes da Organização Mundial de Saúde (OMS).

• Do BSCUP para o centro transplantador: Transporte do produto criopreservado, em temperatura inferior da 150º C negativos, em dispositivo próprio para transporte a seco. 

Em ambos os casos o produto é preparado para o transporte por pessoa treinada e capacitada e acondicionado em recipientes específicos. O transporte pode ser feito por pessoas da própria equipe do Cetebio ou por uma empresa especializada.

Legislação aplicada

• Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009 – Aprova o Regulamento Técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

• RDC Anvisa no 56, de 16 de dezembro de 2010 – Dispõe sobre o regulamento técnico para o funcionamento dos laboratórios de  processamento de células progenitoras hematopoéticas (CPH) provenientes de medula óssea e sangue periférico e bancos de sangue de cordão umbilical e placentário, para finalidade de transplante convencional e dá outras providências.

• Portaria GM/MS no 2712 de 12 de novembro de 2013 – redefine o regulamento técnico de procedimentos hemoterápicos.

• RDC Anvisa no 20 de 10 de abril de 2014 - Dispõe sobre regulamento sanitário para o transporte de material biológico humano.

Informações de interesse técnico

As bolsas de concentrado de hemácias recebidas dos hemocentros parceiros são encaminhadas ao laboratório de processamento, onde têm seu conteúdo transferido para uma bolsa de material específico, resistente a baixas temperaturas (bolsa de congelamento). Nesse momento, são removidas as amostras a serem utilizadas em testes de compatibilidade pré-transfusionais e testes de controle de qualidade. Posteriormente, glicerol é adicionado lentamente à bolsa sobre agitação e, então, esta é congelada.

Tão logo haja solicitação de uma bolsa e os testes de compatibilidade efetuados permitam a realização da transfusão, ela é retirada do armazenamento e descongelada a 37ºC em banho-maria.

Como o glicerol pode causar reações transfusionais graves em pacientes, o mesmo é removido por meio de lavagens, utilizando-se soluções salinas de diferentes concentrações, por meio de um processo automatizado.

Durante todo o processo são realizados testes de controle de qualidade a fim de avaliar a viabilidade das hemácias, a esterilidade de tal produto e a eficiência da remoção do glicerol. A avaliação desses parâmetros é estabelecida por legislação nacional e garante a qualidade do produto final para transfusão. As bolsas não aprovadas pelo controle de qualidade são descartadas e tratadas de acordo com legislação vigente ou encaminhadas ao serviço de pesquisa.

Indicação terapêutica

Pacientes aloimunizados ou que apresentem fenótipo raro devem ser transfundidos utilizando-se CHM que não possua tais antígenos.

Condições para transporte

O transporte é realizado em recipiente térmico refrigerado validado para este fim. A temperatura de transporte do concentrado de hemácias com fenótipo raro deve ser monitorada e pode variar de 1 ºC a 10 ºC.

Legislação aplicada

• Portaria nº 1.353 do Ministério da saúde de 13 de junho de 2011 - Aprova o Regulamento Técnico de procedimentos hemoterápicos.

• RDC nº 57 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária de 16 de dezembro de 2010 – Determina o Regulamento Sanitário para serviços que desenvolvem atividades relacionadas ao ciclo produtivo do sangue humano e componentes e procedimentos transfusionais.

Procedimentos para disponibilização de sangues raros

A solicitação para o fornecimento do concentrado de hemácias com fenótipo raro criopreservado deve ser feita por escrito pelo médico do serviço de hemoterapia mediante confirmação de disponibilidade da unidade fenotipada em estoque. A bolsa de CHM será então descongelada, desglicerolizada e liberada após a confirmação dos testes imunohematológicos e de triagem para marcadores de infecções transmissíveis pelo sangue. A identificação das bolsas de CHM de fenótipo raro deve permitir a rastreabilidade desde a sua obtenção até o término do ato transfusional bem como indicar a validade da unidade disponibilizada. A temperatura de transporte do concentrado de hemácias com fenótipo raro deve ser monitorada e pode variar de 1 ºC  a 10 ºC.

A distribuição dos outros tecidos e células que poderão fazer parte do Cetebio será realizada de acordo com as legislações vigentes e segundo orientações do Sistema Nacional de Transplante. 

Mais informações acesse Doação - Outros tecidos e células.

Referências

• Portaria nº 1.353 do Ministério da saúde de 13 de junho de 2011 -  Aprova o Regulamento Técnico de procedimentos hemoterápicos.
• RDC Anvisa nº 57 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária de 16 de dezembro de 2010 – Determina o Regulamento Sanitário para serviços que desenvolvem atividades relacionadas ao ciclo produtivo do sangue humano e componentes e procedimentos transfusionais.

Informações de interesse técnico

A metodologia definida para o processamento da pele é a preservação do tecido em solução estéril de glicerol 85%. Com esta técnica, o tecido mantém propriedades estruturais e mecânicas importantes para constituição de uma cobertura biológica ideal. A preservação da pele em glicerol tem como principal atividade a imobilização das moléculas de água, não permitindo assim, atividades como crescimento microbiano, reações hidrolíticas e de oxidação. Durante as fases do processamento, amostras de pele são coletadas e testadas quanto à presença de microrganismos.

Indicação terapêutica

• Queimaduras

• Lesões cutâneas extensas

Condições para transporte

O tecido cutâneo é transportado em recipientes térmicos validados em uma temperatura de 4ºC ±2ºC.

Legislação aplicada

• Portaria do Ministério da Saúde no 2600, de 21 de outubro de 2009 – Aprova o Regulamento Técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

• Portaria do Ministério da Saúde nº 2.932, de 27 de setembro de 2010 – Institui, no âmbito do Sistema Nacional de Transplantes (SNT), o Plano Nacional de Implantação de Bancos de Multitecidos (Plano-BMT).

• RDC da Anvisa no 220, de 27-, de dezembro de 2006 – Dispõe sobre o Regulamento Técnico para o Funcionamento de Bancos de Tecidos Musculoesqueléticos e de Bancos de Pele de origem humana.

Procedimentos para disponibilização de pele

O tecido cutâneo é distribuído para transplante após a solicitação documentada do médico transplantador e a autorização da coordenação do Sistema Nacional de Transplantes. Na solicitação é necessário enviar informações sobre o receptor, informações sobre o profissional transplantador, características e quantidade do tecido, indicação terapêutica e procedimento a ser realizado, incluindo local e data prevista.

Instruções técnicas para o armazenamento e utilização são enviadas junto ao tecido no momento da distribuição. 

A distribuição dos outros tecidos e células que poderão fazer parte do Cetebio será realizada de acordo com as legislações vigentes e segundo orientações do Sistema Nacional de Transplante. 

Mais informações acesse Doação - Outros tecidos e células.

Referências

• Portaria nº 2.600 de 21 de outubro de 2009. Aprova o Regulamento técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

Informações de interesse técnico

O processamento desse tipo de tecido se inicia com a limpeza, remoção do sangue e, quando necessário, da medula óssea, através de vários métodos como lavagem, imersão, centrifugação, sonicação e tratamento químico.. No final do processo, o tecido é embalado, selado e armazenado. Durante o processamento, amostras de tecido são coletadas e testadas quanto à presença de microrganismos.

Indicação terapêutica

• Tumores ósseos

• Lesões e reconstruções ligamentares

• Fraturas em geral

• Osteomias

• Artrodese

Condições para transporte

O transporte é realizado em recipiente térmico validado, identificado e exclusivo para essa finalidade em temperatura igual ou inferior a 4ºC.

Legislação aplicada

• RDC Anvisa no 220, de 27 de dezembro de 2006 – Dispõe sobre o Regulamento Técnico para o Funcionamento de Bancos de Tecidos Musculoesqueléticos e de Bancos de Pele de origem humana.

• Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009 – Aprova o Regulamento Técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

• Portaria nº 2.932, de 27 de setembro de 2010 – Institui, no âmbito do Sistema Nacional de Transplantes (SNT), o Plano Nacional de Implantação de Bancos de Multitecidos (Plano-BMT).

Procedimentos para disponibilização de tecidos muscoloesqueléticos

O tecido musculoesquelético é distribuído para transplante após a solicitação documentada do médico transplantador e a autorização da coordenação do Sistema Nacional de Transplantes. Na solicitação é necessário enviar informações sobre o receptor, informações sobre o profissional transplantador, características e quantidade do tecido, indicação terapêutica e procedimento a ser realizado, incluindo local e data prevista.

A distribuição do tecido é acompanhada de instruções técnicas, contendo informações sobre a utilização, armazenamento e instruções caso o tecido não seja utilizado.

O tecido somente poderá ser disponibilizado para pesquisa se não houver demanda assistencial.

A distribuição dos outros tecidos e células que poderão fazer parte do Cetebio será realizada de acordo com as legislações vigentes e segundo orientações do Sistema Nacional de Transplante. 

Mais informações acesse Doação - Outros tecidos e células.

Referências

• Portaria GM/MS nº 2.600 de 21 de outubro de 2009. Aprova o Regulamento técnico do Sistema Nacional de Transplantes

Indicação terapêutica

Pacientes com doenças valvares com indicação para substituição por uma prótese valvar.

Condições para transporte

O transporte é realizado em recipientes térmicos validados em temperaturas extremamente baixas (inferiores a -150ºC).

Legislação aplicada

• Portaria GM/MS no 2600, de 21 de outubro de 2009 – Aprova o Regulamento Técnico do Sistema Nacional de Transplantes.

• Portaria GM/MS nº 2.932, de 27 de setembro de 2010 – Institui, no âmbito do Sistema Nacional de Transplantes (SNT), o Plano Nacional de Implantação de Bancos de Multitecidos (Plano-BMT).

Procedimentos para disponibilização das valvas cardíacas

Os tecidos cardiovasculares são distribuídos para transplante após a solicitação documentada do médico transplantador e a autorização da coordenação do Sistema Nacional de Transplantes. Na solicitação é necessário enviar informações sobre o receptor, informações sobre o profissional transplantador, características e quantidade do tecido, indicação terapêutica e procedimento a ser realizado, incluindo local e data prevista.

Instruções técnicas para o armazenamento e utilização são enviadas junto ao tecido no momento da distribuição.

As valvas cardíacas serão distribuídas para pesquisa somente com a solicitação documentada do pesquisador, local onde será realizado o projeto, cópia do parecer favorável do Comitê de Ética e Pesquisa da Instituição e declaração do pesquisador responsável reconhecendo a impossibilidade do uso destes tecidos para pesquisa clinica em humanos.  

A distribuição dos outros tecidos e células que poderão fazer parte do Cetebio será realizada de acordo com as legislações vigentes e segundo orientações do Sistema Nacional de Transplante. 

Mais informações acesse Doação - Outros tecidos e células.

Referências

• Portaria nº 2.600 de 21 de outubro de 2009. Aprova o Regulamento técnico do Sistema Nacional de Transplantes.